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米糠脂多糖提取物中分离蛋白质

作者:膜分离技术发表时间:2017-10-24 15:27

  米糠是富含植物脂多糖的植物资源。本文就米糠脂多糖制备过程中,蛋白与脂多糖的分离方法进行了研究。结果表明,电点沉淀法和超滤膜分离法的串联应用可充分发挥两者的分离特点,是众多分离蛋白方法中较有效的方法。
 


 

  分离纯化的早期,由于提取液体积大,成分复杂。因此在这一阶段选用萃取、沉淀、吸附、膜分离等一些分辨力较低的手段比较有利。这些手段不仅负荷能力大、一次分离的量多,同时可以除去大部分理化性质相差较大的杂质,为以后进一步分离纯化创造良以需予以先除去。

  几种分离蛋白常用方法有:苯酚法、Sevag法、正丁醇法、叁氯乙酸法、等电点沉淀法和超滤法等。对于蛋白去除率有下列顺序:超滤法>叁氯乙酸法>苯酚法>等电点沉淀法>Sevag法>正丁醇法。

  苯酚是一个弱酸,18℃~19℃时苯酚在水溶液中的解离常数为1.1~1.2×10-10。苯酚和水的混合相具有较高的介电常数。这两个特点赋予了苯酚是许多蛋白的优良溶剂的性质,蛋白在酚相和水相中分配系数的差别很大,以致苯酚可以较完全地把蛋白从水相中提取至酚相中,而水溶、酚不溶的多糖、脂多糖则保留在水相中。而叁氯乙酸法分离蛋白的塬理与上述有机溶剂法不同,它通过与蛋白结合生成不溶性的盐类,达到分离的目的。超滤是加压膜分离技术之一,操作简便,成本低廉,且不引起温度及相的变化。超滤法的分离蛋白效果和LPS保留率均较好。但由于米糠水提液的固形物含量和蛋白含量较高,随着超滤时间的增加,水通量有较严重的下降趋势,原因是膜面可能受到米糠水提液中蛋白的污染,通路有所堵塞,可采用反冲清洗的方法加以解决。

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